樣品稀釋儀是現代實驗室自動化流程中的關鍵設備,廣泛應用于生命科學、臨床診斷、食品安全和環境監測等領域。其核心使命是將高濃度的原始樣品,按照預設的比例,自動、快速、精確地稀釋至目標濃度,為后續的色譜分析、質譜檢測、ELISA實驗或細胞培養等提供合格的樣本。
“垃圾進,垃圾出”是分析測試的黃金法則。稀釋儀作為樣品制備的“第一道關口”,其工作的準確性和可靠性直接決定了整個實驗數據的質量。一個未經良好維護或校準的稀釋儀,即使是微小的體積誤差或攜帶污染,都可能導致批次實驗的失敗、錯誤的結論,甚至在臨床診斷中引發嚴重后果。因此,建立一套科學、規范的維護與校準體系,并非可有可無的“家務活”,而是保障實驗室數據完整性、確保實驗結果可追溯和可信賴的戰略性舉措。本文將系統性地詳解樣品稀釋儀的維護與校準方法,旨在為實驗室管理者和操作人員提供一份全面、實用的行動指南。
一、 維護篇:預防性保養,防患于未然
維護的核心思想是預防性保養,通過日常的、周期性的清潔和檢查,保持設備處于最佳工作狀態,將故障和性能衰退的風險降至低。
1. 日常維護:每次使用前后的“必修課”
清潔與消毒:
外部清潔:每次使用后,使用無絨布和70%異丙醇或合適的實驗室級消毒劑擦拭設備外殼、操作面板和樣品艙,防止交叉污染。
管路與槍頭錐清潔:這是日常維護的重中之重。
執行清洗程序:絕大多數稀釋儀都內置了清洗程序。務必在每批次樣品處理前后,嚴格執行該程序。通常使用去離子水、稀酸(如0.1M HCl,用于去除無機鹽殘留)或稀堿(如0.1M NaOH,用于去除有機物殘留)作為清洗液,通過正壓或負壓沖洗整個液體通路。
手動沖洗:對于關鍵或易受污染的應用,建議在自動清洗程序后,再進行一到兩次手動沖洗。
使用兼容耗材:務必使用廠家推薦的或經過驗證的兼容槍頭錐(Tip Cone)和移液槍頭,劣質耗材是導致泄漏和污染的常見原因。
廢液處理:及時清空廢液瓶,并按生物安全和化學品安全的規定妥善處理廢液,防止溢出或產生有害氣體。
目視檢查:檢查電源線、數據線是否連接牢固,設備有無異常聲響或報警。
2. 每周/每月維護:深度清潔與檢查
管路與閥組的深度清潔:對于處理粘稠、易結晶或含有顆粒物的樣品后,即使執行了日常清洗,也應進行更深度的清潔。
浸泡清洗:將可拆卸的管路、閥門等浸泡在適當的清洗液中(如酶清潔劑用于生物樣品,有機溶劑用于油脂類樣品),一段時間后用純凈水沖洗干凈。
注意:此方法需參考設備手冊,避免損壞敏感部件。
濾芯更換:如果設備配備了用于過濾空氣或樣品的濾芯(如疏水濾芯),應根據使用頻率和水質情況,定期(如每月或每季度)檢查其污染情況,并及時更換。
潤滑:對于帶有機械運動部件(如注射器推桿)的設備,需按手冊要求,定期使用指定的潤滑劑進行潤滑,確保其運動順滑、無阻滯。
校準狀態核查:回顧近期的校準記錄,確認設備在校準有效期內。如發現設備運行異常(如重復性變差),應考慮提前進行校準。
3. 年度/按需維護:專業級保養
全面檢修:聯系廠家或授權的專業工程師進行全面的預防性維護。這可能包括:
拆解并清潔核心部件,如注射泵、旋轉閥的內部腔室。
檢查和更換老化的密封圈、墊圈,這是防止泄漏的關鍵。
檢查和校準內部傳感器(如液位傳感器、壓力傳感器)。
更新設備固件和軟件。
關鍵部件更換:根據部件的使用壽命和實際磨損情況,有計劃地更換高損耗件,如注射器、管路、密封圈等。

二、 校準篇:確保數據溯源,捍衛數據完整性
校準是通過使用標準物質來驗證和調整設備性能,使其測量結果與國家或國際標準保持一致的可追溯過程。
1. 校準前的準備
標準器:
容量校準:需要一套經過法定計量機構檢定合格的高精度微量天平(精度至少達到0.01mg)和與之匹配的校準砝碼。
移液精度與重復性校準:需要使用高純度的去離子水或密度已知的校準液。
環境控制:將設備和天平放置在穩定的環境中,避免溫度、濕度和氣流的劇烈波動,因為這些因素都會影響稱量和液體體積的精度。
文檔準備:準備好校準記錄表,明確本次校準的依據(如JJF 1815-2020 《液液萃取/稀釋儀校準規范》或設備廠商的推薦規程)、校準項目和可接受標準。
2. 關鍵參數的校準方法與可接受標準
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| | 稱重法: 1. 將一個潔凈干燥的容器放在天平上,去皮歸零。 2. 使用稀釋儀的最大和最小量程,分別吸取一定量的去離子水(如100μL, 500μL, 1000μL)至容器中。 3. 記錄天平顯示的水的質量。 4. 根據水的密度(在校準溫度下)將質量換算為體積。 5. 重復測量3-5次,計算每個體積點的平均值和誤差。 | 準確性:誤差 ≤ ±0.5% (或符合廠商規格,如±1%)。 線性:在全量程范圍內的誤差應符合要求。 |
| | 重復性測試: 1. 選擇一個中等體積點(如500μL)。 2. 使用同一支槍頭,連續進行10-15次吸取-排放循環,每次都將液體排入同一個容器。 3. 稱量每次排放的質量,并換算為體積。 4. 計算這組數據的標準偏差(SD)和相對標準偏差(RSD%)。 | RSD% ≤ 1%? (對于大多數應用,高精度設備要求 ≤ 0.5%)。 |
| | 交叉污染測試: 1. 先吸取一個高濃度樣品(或染色液)至廢液杯。 2. 立即執行清洗程序。 3. 再吸取等量的去離子水或空白溶劑。 4. 通過光譜法(如紫外分光光度計)或目視檢查第二次吸取的液體中是否存在第一次樣品的殘留信號或顏色。 | 攜帶污染率 ≤ 0.1%? (或低于方法檢出限)。無任何肉眼可見的交叉污染。 |
| | 終點濃度法: 1. 配制一個已知準確濃度的母液。 2. 使用稀釋儀,按照設定的稀釋比例(如1:10, 1:100)進行稀釋。 3. 使用獨立的、經過校準的分析方法(如HPLC, UV-Vis)測定稀釋后樣品的實際濃度。 4. 將實測濃度與理論濃度進行比較。 | |
| | 計時核查:使用獨立的秒表,核對設備運行預設程序的時間是否準確。 | |
3. 校準結果與處理
所有校準數據必須如實、詳細地記錄在案,并由校準人員簽字確認。
如果所有參數均在可接受標準內,則出具校準證書,證明設備在該時間點性能符合要求。
如果發現任何參數超差,必須立即對設備進行調試、維修或調整(如更換注射器、重新標定傳感器)。維修后,必須重新進行校準,直至所有參數合格。
根據校準結果,評估設備的狀態,并決定是否需要縮短下次校準周期。
三、 最佳實踐與建議
建立SOP:為日常維護、定期保養和校準流程編寫詳細的標準操作規程,確保所有操作人員都能以一致的方式進行。
人員授權與培訓:只有經過嚴格培訓并授權的人員才能進行維護和校準操作。
實施三級維護體系:將維護分為操作員級(日常)、技術員級(周/月)、工程師級(年度),職責分明,層層遞進。
數據管理與追溯:建立設備檔案,將每一次的維護記錄、校準證書、維修歷史、消耗的備件信息等集中管理,實現全生命周期的追溯。
供應商管理:選擇有實力的設備供應商和服務商,確保能獲得及時的技術支持和原廠備件。
結論
樣品稀釋儀的維護與校準,是保障實驗室數據質量的“一體兩翼”。維護是“防御”,通過細致入微的保養,確保設備穩定運行,減少“非戰斗減員”;校準是“校正”,通過建立量值的溯源性,確保每一次移液、每一次稀釋都有據可依,捍衛了數據的準確性和完整性。將這兩項工作提升至實驗室核心管理工作的高度,并持之以恒地執行,是每一位負責任的實驗室管理者和技術人員的必然選擇,也是在日益激烈的科研競爭和嚴格的法規監管中立于不敗之地的根本保障。